消毒劑的習(xí)慣定義：能消除以細(xì)胞繁殖形態(tài)出現(xiàn)的微生物污染的化學(xué)物質(zhì)。

消毒劑的分類定義（USP29 <1072>）：

① 抗菌劑（Antiseptic)

② 化學(xué)殺菌劑 (Chemical Disinfectant)

③ 清潔劑 (Cleaning Agent)

④ 消毒劑 (Disinfectant)

⑤ 衛(wèi)生洗滌劑 (Sanitizing Agent)

⑥ 殺孢子劑 (Sporicidal Agent)

⑦ 滅菌劑 (Sterilant Agent)

一、消毒劑配制及其注意事項(xiàng)

• 按供應(yīng)商的使用說明進(jìn)行配制和儲(chǔ)存 (純化水、注射用水）
• 潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境使用，應(yīng)進(jìn)行除菌過濾。
• 溫度提高，殺菌效力增大。效力驗(yàn)證時(shí)，在常溫下配制。

二、影響消毒劑效力的因素

pH；溫度，濃度；材質(zhì)和附著物質(zhì)；溶劑（水）；接觸時(shí)間；微生物的類型和數(shù)量；

三、消毒劑作用機(jī)理

• 鈍化胞內(nèi)酶活性，影響細(xì)胞的正常代謝（如酚類）
• 阻斷物質(zhì)運(yùn)輸通道（如季銨鹽類（+ 電荷），附著于細(xì)胞膜特定部分（- 電荷）
• 破壞微生物細(xì)胞（膜）的結(jié)構(gòu)和功能（如醛類、含氯、過氧化物）

四、微生物對消毒劑的耐受性受以下幾方面因素的影響

• 形成生物膜（粘性多糖物質(zhì)）
• 消毒劑的相互作用（中和反應(yīng)）
• 固有耐受性和概率殘存
• 致死劑量

五、微生物抗力由小到大排列

一般為細(xì)菌繁殖體 -- 真菌繁殖體 -- 真菌孢子 -- 病毒 -- 分枝桿菌 -- 細(xì)菌芽孢

六、消毒劑的選擇考慮如下因素

• 需控制的微生物的類型和數(shù)量
• 市售消毒劑的抗菌譜
• 消毒劑的品牌
• 濃度、使用方法和接觸時(shí)間
• 待消毒物體的材質(zhì)和對消毒劑的兼容性
• 可能影響殺菌效力的表面有機(jī)物數(shù)量
• 反復(fù)使用，對設(shè)備表面的腐蝕程度
• 對操作者的安全性
• 和清潔劑 / 其它消毒劑的相容性
• 交替使用方案和對產(chǎn)品的影響

七、消毒劑驗(yàn)證步驟

第一步：在實(shí)驗(yàn)室對代表細(xì)菌在規(guī)定的使用濃度和規(guī)定的作用時(shí)間進(jìn)行確認(rèn)。

第二步：應(yīng)用不同材質(zhì)的載體，進(jìn)行模擬試驗(yàn)

第三步：完成驗(yàn)證報(bào)告，形成 SOP。

八、驗(yàn)證用菌種

金黃色葡萄球菌、銅綠色假單胞菌、沙門氏菌、大腸埃希菌、枯草桿菌、白色念珠菌、黑曲霉、環(huán)境分離菌。

菌種選擇的原則：代表性，普遍性，標(biāo)準(zhǔn)菌種。(環(huán)境中常見的污染菌）。菌種的要求：不得超過 5 代。

采用適宜的方法保存。

九、挑戰(zhàn)微生物 (USP29)

十、準(zhǔn)備性試驗(yàn)

選擇適合的中和劑：Letheen 肉湯、D/E 中和肉湯（酚類，季銨鹽類）、TAT 肉湯基礎(chǔ) + 吐溫 20 + 卵磷脂 + 胰蛋白胨

10.1. D/E 中和肉湯配方（每升）

胰蛋白胨 5g；酵母膏 2.5g；葡萄糖 10g；硫乙醇酸鈉 1g；硫代硫酸鈉 6g；亞硫酸氫鈉 2.5g；吐溫 805g；卵磷脂 7g；溴甲酚紫 0.02g；最終 pH7.6±0.2 于 25℃；

10.2. 準(zhǔn)備性試驗(yàn)之中和劑毒性

將 10 ～ 100CFU 的微生物加入到中和劑中；薄膜過濾，沖洗，培養(yǎng)，計(jì)數(shù)￠與菌液對照組比較，回收率應(yīng) >70%

10.3. 準(zhǔn)備性試驗(yàn)之中和效力

使用中稀釋檢測（use-dilutiontests)(對不同濃度下，對消毒劑的效力進(jìn)行篩選；針對不同標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)境微生物，確認(rèn)接觸時(shí)間）

• 將消毒劑和中和劑混合（記錄時(shí)間）
• 加入 10 ～ 100CFU 微生物￠薄膜過濾，沖洗，培養(yǎng)，計(jì)數(shù)
• 與菌液對照組比較，回收率應(yīng) >70% 驗(yàn)證方法

薄膜過濾法：菌懸液和消毒劑直接混合，在不同的時(shí)間間隔條件下過濾，培養(yǎng)后評價(jià)。

十一、驗(yàn)證準(zhǔn)備

測試菌液準(zhǔn)備：增菌過夜，并調(diào)整至 106 ～ 108CFU/ml

消毒劑稀釋至規(guī)定濃度：分裝 10ml 于若干無菌試管中；試管上標(biāo)注消毒時(shí)間：如“1 分鐘組”，“5 分鐘組”，“10 分鐘組”或其他要求的時(shí)間段。

配制中和劑（分裝 100ml，300ml）驗(yàn)證步驟：

接種：接種各驗(yàn)證菌種至盛有待驗(yàn)證消毒劑的試管（使接后濃度 >104CFU/ml)，混合均勻，并立即開始計(jì)時(shí)。

中和、過濾：將消毒劑傾入 100ml 中和劑中，混合，稀釋（如需要），過濾，然后用 100ml 中和劑清洗濾膜，濾過 3 次。

陽性對照：用無菌水代替消毒劑，步驟同上。

培養(yǎng)和計(jì)數(shù)：取下濾膜放入規(guī)定的培養(yǎng)基平板，在規(guī)定的溫度、時(shí)間培養(yǎng)后，記數(shù)。和陽性對照相比，微生物數(shù)量下降應(yīng)至少 3 個(gè)對數(shù)值（細(xì)菌芽孢至少 2 個(gè)對數(shù)值）。

表面挑戰(zhàn)試驗(yàn)（surfacechallengetests)

• 使用標(biāo)準(zhǔn)菌株和典型環(huán)境分離微生物
• 選擇合適的濃度和接觸時(shí)間，進(jìn)行試驗(yàn)
• 獲得挑戰(zhàn)微生物數(shù)量下降的對數(shù)值
• 對使用新消毒劑前后環(huán)境微生物的檢出頻率和數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)評估（無菌生產(chǎn)區(qū)域、GMP 要求）
• 根據(jù)設(shè)施的實(shí)際情況，選擇不同材質(zhì)的載體（玻璃，不銹鋼，塑料薄膜，乳膠，墻面涂料，地面材質(zhì)）
• 接種，并確認(rèn)實(shí)際數(shù)量
• 接觸殺菌、中和、過濾。

十二、正確使用消毒劑

• 稀釋消毒劑時(shí)應(yīng)用純化水、注射用水
• 設(shè)備使用后徹底清潔
• 將環(huán)境常見菌列入驗(yàn)證范疇
• 輪換使用不同的消毒劑，消毒劑間要用無菌水充分清洗
• 消毒的 SOP：配制、使用、糾正、防護(hù)等
• 供應(yīng)商的審核和確認(rèn)

十三、消毒劑的文件

• 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SOP
• 消毒劑配制記錄
• 消毒劑使用記錄
• 消毒劑標(biāo)簽消毒劑文件，應(yīng)該等同于原始記錄。

有需要客戶可咨詢美卓消毒驗(yàn)證服務(wù)！

美卓產(chǎn)品信息詳見：http://www.dgwangming.com/?cat=2，咨詢采購加微：18072756351

本圖文由杭州美卓生物整理后轉(zhuǎn)發(fā)，如有侵權(quán)，請聯(lián)系刪除！