生物制藥領(lǐng)域?qū)崈舡h(huán)境的要求條例比較多，作為潔凈等級中最低級的 D 級區(qū)域也要注意空間環(huán)境的消毒殺菌處理。在新版 GMP 的框架下 D 級潔凈區(qū)的作用、標(biāo)準(zhǔn)、管控已被重新定義，成為無菌生產(chǎn)體系中的防線。所以生物制藥 D 級潔凈區(qū)空間消毒，也需要有新的標(biāo)準(zhǔn)出現(xiàn)，采用特定的滅菌設(shè)備對 D 級潔凈區(qū)空間展開規(guī)范的滅菌處理手段。

一、新版 GMP 對 D 級潔凈區(qū)的標(biāo)準(zhǔn)定位

新版 GMP 對 D 級潔凈區(qū)的定義涵蓋了潔凈度限值，更強(qiáng)調(diào)作為整個潔凈區(qū)“緩沖區(qū)”、“預(yù)防帶”的戰(zhàn)略角色，明確提出應(yīng)基礎(chǔ)微生物、動態(tài)污染和消毒制度執(zhí)行等功能。

新版 GMP 中對潔凈級別的思想已發(fā)生結(jié)構(gòu)性變化，將 D 級區(qū)從“間接參和生產(chǎn)”的空間角色，升級為“微生物預(yù)防環(huán)節(jié)”的節(jié)點。設(shè)計目的不再只是滿足空氣懸浮粒子標(biāo)準(zhǔn)，成為污染源、人員更衣緩沖、物料滅菌緩沖和環(huán)境過渡等多個功能模塊的支撐平臺。

D 級區(qū)域在新版標(biāo)準(zhǔn)中符合以下三類核心指標(biāo)：空氣潔凈度、表面微生物載量、動態(tài)操作下污染風(fēng)險評估。空氣潔凈度設(shè)定為最大容許限值 20 萬個 0.5μm/m3粒子（非運行狀態(tài)），但運行狀態(tài)的微生物采樣要求也已從“可參考”變?yōu)椤皬?qiáng)制執(zhí)行”，并動態(tài)操作路徑設(shè)立采樣點位和頻率。換句話說，D 級區(qū)域不參和無菌操作，也實時監(jiān)測污染趨勢，成為污染源滋生地。

人員行為、物料通道、設(shè)備路徑等細(xì)節(jié)，也在 D 級區(qū)內(nèi)被明確管控。穿戴流程、洗消節(jié)點、物品暫存區(qū)布置，納入污染風(fēng)險評估邏輯，不得簡單視為“過渡區(qū)域”。某些情況下，D 級區(qū)用于儲存經(jīng)過滅菌的包裝材料或內(nèi)包裝備件，實施和 B 級同等頻次的清潔和消毒制度。

二、D 級區(qū)的空間消毒方式方法

空間消毒作為微生物負(fù)載的核心措施，在 D 級區(qū)域的執(zhí)行方式，決定了整個潔凈區(qū)防污染鏈條的完整性。A 級區(qū)的“高強(qiáng)度動態(tài)”，D 級區(qū)的消毒任務(wù)更偏污染抑制，目的是維持穩(wěn)定微生物水平、防止外源污染輸入和區(qū)域交叉感染。

新版 GMP 提出：D 級區(qū)至少每月進(jìn)行一次空間消毒，應(yīng)在操作前后各進(jìn)行一次清潔或消毒作業(yè)，以降低污染積累風(fēng)險。區(qū)域用于存儲包裝物、內(nèi)包材料或和生產(chǎn)區(qū)域動態(tài)連接，則消毒頻次應(yīng)參照相鄰高等級區(qū)域同步執(zhí)行，不得因“名義等級較低”降低標(biāo)準(zhǔn)。

空間消毒方法應(yīng)采用噴霧、干霧、蒸發(fā)器氣化的過氧化氫消毒設(shè)備等覆蓋性手段，消毒劑能均勻接觸至墻面、天花板、地面及設(shè)備外表面。人工擦拭僅可作為局部補充手段使用，在 D 級區(qū)內(nèi)設(shè)置通風(fēng)孔、管線接口、異形墻面等結(jié)構(gòu)復(fù)雜部位時，更需選擇擴(kuò)散性強(qiáng)的消毒方式。

三、消毒劑選擇和效果驗證

在 D 級潔凈區(qū)的空間消毒實踐中，消毒劑的選擇和驗證是操作體系中的重頭戲。此區(qū)域常作為人員、物料的預(yù)處理緩沖帶，所使用的消毒劑兼顧高效滅菌能力和良好的表面相容性，因腐蝕、殘留、氣味過強(qiáng)等問題對后續(xù)高等級區(qū)域造成干擾。

常見消毒目標(biāo)，理想的 D 級區(qū)消毒劑應(yīng)以下特征：殺菌、對真菌和芽孢、非揮發(fā)性強(qiáng)氣味、降解、無腐蝕性。在現(xiàn)實選擇中，過氧化氫復(fù)配類、含銀穩(wěn)定型、季銨鹽增效配方、或低濃度高效醇系產(chǎn)品為較常見的選擇路徑。配方能兼顧殺菌效率和材質(zhì)友好度，不會因長期使用造成設(shè)備表面氧化、涂層剝離或產(chǎn)生設(shè)備異響。

驗證方法方面，需消毒劑類型進(jìn)行生物效力測試。包括但不限于使用標(biāo)準(zhǔn)微生物（如枯草芽孢桿菌）進(jìn)行殺滅時間驗證、氣霧分布模擬測試、殘留物 pH 值檢測、材質(zhì)兼容性測試等。在氣化類消毒劑使用后，評估通風(fēng)系統(tǒng)是否可快速排除殘留氣體，對人員和高等級空間造成危害。

應(yīng)建立消毒劑輪換制度，定期更換不同作用的消毒劑，防止微生物形成耐藥生物膜結(jié)構(gòu)。每一種新型消毒劑投入使用前，現(xiàn)場模擬驗證流程，形成標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP），并將結(jié)果作為清潔驗證文件歸檔。

生物制藥中的 D 級潔凈區(qū)，看似邊緣、實則中堅。消毒制度的科學(xué)性、執(zhí)行的度、操作的標(biāo)準(zhǔn)化程度，影響本身微生物負(fù)載水平，更決定了對 B 級、A 級區(qū)域的保護(hù)效果，影響整條無菌鏈路的穩(wěn)定和風(fēng)險可控性。