消毒劑的習(xí)慣定義：能消除以細(xì)胞繁殖形態(tài)出現(xiàn)的微生物污染的化學(xué)物質(zhì)。

消毒劑的分類定義（USP29<1072>）：

①抗菌劑（Antiseptic)

②化學(xué)殺菌劑(Chemical Disinfectant)

③清潔劑(Cleaning Agent)

④消毒劑(Disinfectant)

⑤衛(wèi)生洗滌劑(Sanitizing Agent)

⑥殺孢子劑(Sporicidal Agent)

⑦滅菌劑(Sterilant Agent)

一、消毒劑配制及其注意事項(xiàng)

按供應(yīng)商的使用說(shuō)明進(jìn)行配制和儲(chǔ)存(純化水、注射用水）

潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境使用，應(yīng)進(jìn)行除菌過(guò)濾。

溫度提高，殺菌效力增大。效力驗(yàn)證時(shí)，在常溫下配制。

二、影響消毒劑效力的因素

pH；溫度，濃度；材質(zhì)和附著物質(zhì)；溶劑（水）；接觸時(shí)間；微生物的類型和數(shù)量；

三、消毒劑作用機(jī)理

鈍化胞內(nèi)酶活性，影響細(xì)胞的正常代謝（如酚類）

阻斷物質(zhì)運(yùn)輸通道（如季銨鹽類（+電荷），附著于細(xì)胞膜特定部分（-電荷）

破壞微生物細(xì)胞（膜）的結(jié)構(gòu)和功能（如醛類、含氯、過(guò)氧化物）

四、微生物對(duì)消毒劑的耐受性受以下幾方面因素的影響

形成生物膜（粘性多糖物質(zhì)）

消毒劑的相互作用（中和反應(yīng)）

固有耐受性和概率殘存

致死劑量

五、微生物抗力由小到大排列

一般為細(xì)菌繁殖體--真菌繁殖體--真菌孢子--病毒--分枝桿菌--細(xì)菌芽孢

六、消毒劑的選擇考慮如下因素

需控制的微生物的類型和數(shù)量

市售消毒劑的抗菌譜

消毒劑的品牌

濃度、使用方法和接觸時(shí)間

待消毒物體的材質(zhì)和對(duì)消毒劑的兼容性

可能影響殺菌效力的表面有機(jī)物數(shù)量

反復(fù)使用，對(duì)設(shè)備表面的腐蝕程度

對(duì)操作者的安全性

和清潔劑/其它消毒劑的相容性

交替使用方案和對(duì)產(chǎn)品的影響

七、消毒劑驗(yàn)證步驟

第一步：在實(shí)驗(yàn)室對(duì)代表細(xì)菌在規(guī)定的使用濃度和規(guī)定的作用時(shí)間進(jìn)行確認(rèn)。

第二步：應(yīng)用不同材質(zhì)的載體，進(jìn)行模擬試驗(yàn)

第三步：完成驗(yàn)證報(bào)告，形成SOP。

八、驗(yàn)證用菌種

金黃色葡萄球菌、銅綠色假單胞菌、沙門(mén)氏菌、大腸埃希菌、枯草桿菌、白色念珠菌、黑曲霉、環(huán)境分離菌。

菌種選擇的原則：代表性，普遍性，標(biāo)準(zhǔn)菌種。(環(huán)境中常見(jiàn)的污染菌）。菌種的要求：不得超過(guò)5代。

采用適宜的方法保存。

九、挑戰(zhàn)微生物(USP29)

十、準(zhǔn)備性試驗(yàn)

選擇適合的中和劑：Letheen肉湯、D/E中和肉湯（酚類，季銨鹽類）、TAT肉湯基礎(chǔ)+吐溫20+卵磷脂+胰蛋白胨

10.1.D/E中和肉湯配方（每升）

胰蛋白胨5g；酵母膏2.5g；葡萄糖10g；硫乙醇酸鈉1g；硫代硫酸鈉6g；亞硫酸氫鈉2.5g；吐溫805g；卵磷脂7g；溴甲酚紫0.02g；最終pH7.6±0.2于25℃；

10.2.準(zhǔn)備性試驗(yàn)之中和劑毒性

將10～100CFU的微生物加入到中和劑中；薄膜過(guò)濾，沖洗，培養(yǎng)，計(jì)數(shù)￠與菌液對(duì)照組比較，回收率應(yīng)>70%

10.3.準(zhǔn)備性試驗(yàn)之中和效力

使用中稀釋檢測(cè)（use-dilutiontests)(對(duì)不同濃度下，對(duì)消毒劑的效力進(jìn)行篩選；針對(duì)不同標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)境微生物，確認(rèn)接觸時(shí)間）

將消毒劑和中和劑混合（記錄時(shí)間）

加入10～100CFU微生物￠薄膜過(guò)濾，沖洗，培養(yǎng)，計(jì)數(shù)

與菌液對(duì)照組比較，回收率應(yīng)>70%驗(yàn)證方法

薄膜過(guò)濾法：菌懸液和消毒劑直接混合，在不同的時(shí)間間隔條件下過(guò)濾，培養(yǎng)后評(píng)價(jià)。

十一、驗(yàn)證準(zhǔn)備

測(cè)試菌液準(zhǔn)備：增菌過(guò)夜，并調(diào)整至106～108CFU/ml

消毒劑稀釋至規(guī)定濃度：分裝10ml于若干無(wú)菌試管中；試管上標(biāo)注消毒時(shí)間：如“1分鐘組”，“5分鐘組”，“10分鐘組”或其他要求的時(shí)間段。

配制中和劑（分裝100ml，300ml）驗(yàn)證步驟：

接種：接種各驗(yàn)證菌種至盛有待驗(yàn)證消毒劑的試管（使接后濃度>104CFU/ml)，混合均勻，并立即開(kāi)始計(jì)時(shí)。

中和、過(guò)濾：將消毒劑傾入100ml中和劑中，混合，稀釋（如需要），過(guò)濾，然后用100ml中和劑清洗濾膜，濾過(guò)3次。

陽(yáng)性對(duì)照：用無(wú)菌水代替消毒劑，步驟同上。

培養(yǎng)和計(jì)數(shù)：取下濾膜放入規(guī)定的培養(yǎng)基平板，在規(guī)定的溫度、時(shí)間培養(yǎng)后，記數(shù)。和陽(yáng)性對(duì)照相比，微生物數(shù)量下降應(yīng)至少3個(gè)對(duì)數(shù)值（細(xì)菌芽孢至少2個(gè)對(duì)數(shù)值）。

表面挑戰(zhàn)試驗(yàn)（surfacechallengetests)

使用標(biāo)準(zhǔn)菌株和典型環(huán)境分離微生物

選擇合適的濃度和接觸時(shí)間，進(jìn)行試驗(yàn)

獲得挑戰(zhàn)微生物數(shù)量下降的對(duì)數(shù)值

對(duì)使用新消毒劑前后環(huán)境微生物的檢出頻率和數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)估（無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)域、GMP要求）

根據(jù)設(shè)施的實(shí)際情況，選擇不同材質(zhì)的載體（玻璃，不銹鋼，塑料薄膜，乳膠，墻面涂料，地面材質(zhì)）

接種，并確認(rèn)實(shí)際數(shù)量

接觸殺菌、中和、過(guò)濾。

十二、正確使用消毒劑

稀釋消毒劑時(shí)應(yīng)用純化水、注射用水

設(shè)備使用后徹底清潔

將環(huán)境常見(jiàn)菌列入驗(yàn)證范疇

輪換使用不同的消毒劑，消毒劑間要用無(wú)菌水充分清洗

消毒的SOP：配制、使用、糾正、防護(hù)等

供應(yīng)商的審核和確認(rèn)

十三、消毒劑的文件

標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP

消毒劑配制記錄

消毒劑使用記錄

消毒劑標(biāo)簽消毒劑文件，應(yīng)該等同于原始記錄。

有需要客戶可咨詢美卓消毒驗(yàn)證服務(wù)！